Double coloration carmin aluné-vert d'iode

Colorants utilisés
Carmin aluné
Peser 1 g de carmin 
         4 g d'alun de potassium :KAl(SO4)2, 12H2O (en pharmacie)
Compléter à 100mL avec eau déminéralisée dans une fiole.
Porter à ébullition. Laisser refroidir. Filtrer.
Conditionner en flacon de 10 mL pour les élèves
Plus d'info:colorant carmin aluné
Vert d'iode
Peser 1 g de vert d'iode, compléter à 100 mL avec eau déminéralisée dans une fiole. Pas d'ajout de phénol.
Plus d'info:colorant vert d'iode
BUT:
Les tissus cellulosiques sont colorés en rose, rouge; les tissus lignifiés et subérifiés sont colorés en vert, bleu.

Sur le web et des manuels j'ai lu diverses méthodes de coloration et des avis différents sur des forums comme celui du site lenaturaliste.net.

Voici 3 méthodes pour utiliser ces 2 colorants alternativement ou simultanèment après avoir réalisé des coupes à main levée ou au microtome.

 Méthode 1
sur fiche SVT du web ou éditeurs de manuels

Méthode 2
Auteur:G.L Auderset.Lien
Méthode 3
selon P.Stouff et arrangé par moi-même

bain de Javel 2,6% 20mn
bain ED x2
bain acide acétique à 1% 5mn
bain ED
bain de carmin aluné:15mn
bain ED
bain de vert d'iode:10s
bain ED x2

bain de Javel 2,6% 20mn
bain ED x2
bain acide acétique à 1% 5-10mn
bain vert d'iode(dilué au 1/2) 10s
bain d'éthanol à 90°: 2x
bain ED
bain carmin aluné:15mn
bain ED 2x 

bain de javel 2,6% 20mn
bain ED 2x
acide acétique à 1%:10mn
mélange des 2 colorants: 14 gttes carmin aluné
+ 1 gtte vert d'iode: 5mn
bain ED x2
methode1 methode2 methode3a

Inconvénients: coloration un peu aléatoire.
Si la méthode est utilisée pour des vaisseux de
poireaux, il est aisé de les maintenir avec la pince
dans le vert d'iode afin de ne dépasser le délai de 10s.
Pour des coupes de tiges ou de racines, sans
micropline c'est quasiment impossible.

Avantage: coloration meilleure car l'excès de vert est
enlevé
Inconvénient: + long que la 1ère méthode, délai du
vert d'iode
Avantage: méthode la + rapide, coloration correcte si
les 2 colorants ne sont pas mélangés à l'avance mais
au moment de l'emploi
Tout dépend aussi des réglages de la caméra oculaire, très important pour avoir des images correctes, surtout lors d'un montage dans l'eau et non dans de la glycérine

A quoi servent les produits?

Produit Utilisation Fournisseurs
ljavel détruit le contenu du cytoplasme des cellules végétales sans détruire les parois sans additifs ajoutés; supermarchés
acide acétique(= éthanoïque) 100mL ds 1L ED sert de mordant: accrochage des colorants Jeulin;Pierron, Sordalab,MEP
éthanol supprimer l'éxédent de colorant Jeulin;Pierron, Sordalab,MEP
ED= eau déminéralisée rinçage et/ou éliminer traces du produit du bain précédent eau sans arôme pour fer à repasser: supermarché
carmin et vert d'iode colorants de la cellulose ou de la lignine Jeulin;Pierron, Sordalab,MEP